一、應(yīng)用背景
代謝組學(xué)是對生物體內(nèi)所有代謝物進(jìn)行定性和定量分析,并研究代謝物與生理病理變化的關(guān)系的一門學(xué)科,在脂質(zhì)代謝物的研究中,血清樣本的預(yù)處理是一個(gè)關(guān)鍵步驟。脂質(zhì)代謝物通常存在于復(fù)雜的生物環(huán)境中,其濃度較低且易受干擾,因此需要對血清樣本進(jìn)行精確的濃縮和純化,以提高后續(xù)檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。
吉艾姆真空離心濃縮儀通過結(jié)合離心力、低溫蒸發(fā)和加熱蒸發(fā)等方法,能夠快速有效地去除樣本中的溶劑,實(shí)現(xiàn)樣本快速、高效濃縮。
二、實(shí)驗(yàn)過程-脂質(zhì)代謝物樣品前處理
1、樣品采集與制備
(1)用2ml規(guī)格離心管用移液器取50ul血清樣本;
(2)加300ul甲醇(內(nèi)含標(biāo)記物);
(3)加1ml二氯甲烷(提取脂質(zhì)代謝物);
(4)加300ul純水(與甲醇互溶)后渦旋混勻
(5)放入離心機(jī),轉(zhuǎn)速14000rpm離心10分鐘,分層取下層清液800ul(液液萃?。?,放入1.5ml規(guī)格離心管
2、樣品濃縮
實(shí)驗(yàn)使用吉艾姆冷凍型Auto R1-Plus離心濃縮儀
(1)啟動(dòng)離心濃縮儀
(2)打開冷阱開關(guān),按start鍵冷阱預(yù)冷
(3)設(shè)置主機(jī)預(yù)冷
(4)冷阱預(yù)冷20分鐘后將樣品放入離心腔,設(shè)置溫度10℃,轉(zhuǎn)速1500rpm,蒸干
3、復(fù)溶
濃縮后的樣品復(fù)溶至50ul
4、質(zhì)譜分析
三、濃縮效果
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
在代謝組學(xué)研究中,選擇冷凍離心濃縮儀是較為理想的選擇。代謝組學(xué)聚焦生物體內(nèi)小分子代謝物分析,這些代謝物對溫度敏感。而冷凍離心濃縮儀的低溫環(huán)境可防止代謝物因高溫發(fā)生降解、變性或揮發(fā),確保樣品完整性。它能快速濃縮樣品,提高代謝物濃度,為后續(xù)檢測分析提供高質(zhì)量樣本,且高效的濃縮能力可提升實(shí)驗(yàn)效率,能更好地滿足代謝組學(xué)研究對樣品處理的嚴(yán)格要求。
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